180 ARTICLE TECHNIQUECéramides / eramides Propriétés fonctionnelles le céramide racémique 2, le ratio des mélanges lipidiques de céramides in vitro : une capacité formes (2S, 3S), (2R, 3R), (2S, 3R), (2R, et de cholestérols ont été préparées essentielle à former une 3S) est d’environ 15, 15, 35, 35 (ratio et dans chaque solution un filtre à barrière membranaire diastéréoisomère : forme thréo / forme membrane (membrane de cellulose, érythroïque = 3/7). D’autre part, pour notre ϕ-0,2 μm) a été immergé. Chaque filtre En utilisant la méthode rapportée plus céramide 2, Céramide TIC001, le contenu a été séché, permettant la coagulation, haut (12)par le Dr Akasaki et al., nous de la forme (2S, 3R) était > 97 %. Pour nos puis placé sur le dessus d’un flacon avons évalué la capacité essentielle de tests, deux échantillons de céramides en contenant de l’eau purifiée (10 ml), notre céramide TIC001 (céramide 2) à guise de référence ont été utilisés, l’un étaitpuis maintenu avec un bouchon former une barrière membranaire. le céramide 3, une substance optiquement perforé. Après avoir placé chaque active fabriquée par Gist-Brocades et récipient dans une chambre thermos- • Échantillons l’autre, un pseudo-céramide élaboré sur tatique à 60°C, nous avons mesuré la Nous avons utilisé quatre types de la base de la littérature scientifi que (13). perte en poids au fil du temps (n = 5) céramides dans ce test. La Figure 2 et déterminé la capacité de la fonction montre un chromatogramme par HPLC • Méthodes barrière lipidique à empêcher la perte du céramide 2 avec une colonne optique- Des solutions de chloroforme consti- en eau. Les tests ont été réalisés à ment active (Sumichiral OA-4600). Dans tuées de différents rapports de 60°C pour prévenir des fissures de la membrane à un niveau aussi bas que possible et pour déterminer avec précision la fonction barrière de la 10.0 Cコントロールontrol structure membranaire lipidique. 8.0 Rラaセcミem体ate • Résultats et discussion 6.0 Le ratio céramide / cholestérol dans 4.0 lequel la fonction barrière la plus élevée a été observée avec cette méthode 2.0 (2S, 3R) -form test a été de 1 / 2 (rapport pondéral) ; Ce 0.0 0 1 2 3 4 5 Time（ day ） FIGURE 3 : lation, and then placed on the top of VITESSE DE TRANSMISSION DE VAPEUR D’UNE MEMBRANE RECOUVERTE a vial containing purifi ed water (10ml) DE CÉRAMIDE 2 / CHOLESTÉROL COMPARAISON ENTRE UN ACTIF OPTIQUE ET UN CÉRAMIDE 2 RACÉMIQUE. and then fi xed with a perforated cap. VAPOR TRANSMISSION VELOCITY OF CERAMIDE 2 / CHOLESTEROL COATED MEMBRANE Storing each container in a thermostatic COMPARISON OF OPTICALLY ACTIVE AND RACEMIC CERAMIDE 2. chamber at 60°C, we measured weight loss over time (n=5) and determined the in the marketplace for cosmetic use (8-11). OA-4600). In the racemic ceramide 2, barrier function of the lipids to prevent In this report we would like to discuss the the ratio of the (2S,3S): (2R,3R): water loss. The experiments were perfor- unique functional properties provided by (2S,3R): (2R,3S) forms is approxima- med at 60°C to keep any cracking of “optical active substances”, in general, tely 15:15:35:35 (diastereomer ratio: the membrane to as minimum a level as and, more specifi cally, “optically active threo-form: erythro-form = 3:7). On the possible in order to accurately determine ceramides”. other hand, in our ceramide 2, Ceramide the barrier function of the lipid membrane TIC-001, the content of the (2S,3R)-form structure. In vitro functional properties: was >97%. For the other reference Essential barrier membrane ceramides for our testing, two samples • Results and discussion forming capability were used; one was ceramide 3, an The ratio of ceramide: cholesterol at optically active substance manufactured which the highest barrier function was Utilizing a previously reported method(12) by Gist-Brocades and the other was a observed in this test method was 1:2 by Dr. Akasaki et al., we evaluated the pseudo-ceramide prepared according (weight ratio) and there was no barrier essential barrier membrane forming literature (13) membrane formed by using ceramide . capability of our ceramide TIC-001 alone. Under these test condition, it (ceramide 2) • Methods seemed that incorporation of twice Chloroform solutions consisting of various (by weight) as much cholesterol (about • Samples ratios of lipid mixtures of ceramides and three times by mole) than ceramide We used four kinds of ceramides in this cholesterols were prepared and into prevented any uneven crystallization of test. Figure 2 shows a chromatogram each solution was immersed a membrane the ceramide. of ceramide 2 utilizing HPLC with an filter (cellulose membrane, ϕ-0.2µm). When comparing the barrier functions